Postgrado HPLC-TLC, GC

INTRODUCCIÓN A LA CROMATOGRAFÍA

Introducción histórica y conceptos generales

Parámetros cromatográficos

Teoría de la separación cromatográfica

Técnicas cromatográficas:

Cromatografía Plana o Cromatografía en capa fina (CCF o TLC)

Cromatografía de gases (CG)

Cromatografía Líquida de alta resolución (HPLC)

Tipos de cromatografías

CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN (HPLC)

Instrumentación

Sistema de bombeo

Inyector

Horno de columna

Columnas y fase estacionaria

Material de base

-Base sílice

-Base polimérica

Partículas de relleno

Composición química

Dimensiones

Aspectos básicos de las columnas

Fase móvil

Mecanismos de separación

-Adsorción

-Partición

-Intercambio iónico

-Exclusión molecular

Conservación

Detector

Tipos de detectores

-Detector UV-Vis

-Detector de fluorescencia

-Detector de Índice de Refracción (RID)

-Detector conductimétrico

-Detector de ELCD (Evaporative Light Scattering)

-Detector espectrómetro de masas (MS)

Cualificación del sistema cromatográfico de HPLC

Cualificación del diseño (DQ)

Cualificación de la instalación (IQ)

Cualificación de la operación (OQ)

Cualificación del funcionamiento (PQ)

Adquisición y tratamiento de datos

Tratamiento de la información

Tratamiento de la señal cromatográfica: integración

Análisis cualitativo

Análisis cuantitativo

Métodos de cuantificación relativos

Normalización

Normalización corregida

Métodos de cuantificación absolutos

Patrón externo

Patrón interno

Adición estándar

Desarrollo de métodos de análisis en HPLC

Objetivos de la separación

Pretratamiento de muestra

Selección método de detección

Selección método cromatográfico

Ensayos previos

Optimización de la separación cromatográfica

Métodos de cuantificación relativos

Cálculos

Estimación de fiabilidad de los resultados

Desarrollo de métodos de HPLC en fase reversa

Troubleshooting

Prácticas:

Cualificación operacional de un equipo de HPLC

Análisis cualitativo y cuantitativo de una familia de conservantes en crema

Análisis cualitativo y cuantitativo de alcaloides en alimentos

Influencia del pH en el análisis cualitativo y cuantitativo de conservantes en alimentos

Desarrollo de métodos de análisis (simulación)

Determinación de Principio Activo Farmacéutico en un producto farmacéutico

CROMATOGRAFÍA PLANA

Principios fundamentales de la cromatografía plana

Principales aplicaciones (o campos de aplicación)

Desarrollo de métodos de separación

Técnicas avanzadas en cromatografía plana

Cromatografía en capa fina de alta resolución (HPTLC)

Troubleshooting

Aplicación de la técnica según Farmacopea Europea

Prácticas:

Desarrollo de métodos de separación

Estudio de la separación de isómeros posicionales

Estudio del Límite de Detección de compuestos en CCF

Estudio de preparación y uso de reveladores para CCF

Desarrollo de métodos para separación de Principios Activos Farmacéuticos

CROMATOGRAFÍA DE GASES

Principios generales de la cromatografía de gases

Instrumentación

?Inyector

-Inyector de vaporización

-Inyector on column

-Inyección split/ splitless

-Inyección por vaporización a temperatura programada (PTV)

-Inyector headspace

-Séptums

-Férulas

-Jeringas

-Mantenimiento del inyector

?Horno de columna

?Columnas

-Columnas de relleno

-Columnas capilares

-Absorbentes

-Fase estacionaria

?Detector

-Clasificación

-Tipos de detectores y sus aplicaciones

Detector de Ionización de llama (FID)

Detector de conductividad térmica (TCD)

Detector de captura de electrones (ECD)

Detector de ionización termoiónico (nitrógeno/fósforo) (NPD)

Detector fotométrico de llama (FPD)

Detector espectrómetro de masas (MS)

Detector de fotoionización (PID)

Detector de emisión atómica (AED)

Detector de quimiluminiscencia

Otros

?Gases para GC

?Control de la temperatura

?Cualificación del sistema cromatográfico de GC

?Cualificación del diseño (DQ)

?Cualificación de la instalación (IQ)

?Cualificación de la operación (OQ)

?Cualificación del funcionamiento (PQ)

Tratamiento de datos

?Cualificación del diseño (DQ)

Análisis cualitativo

?Identificación

?Cálculo del índice de Kovats

?Metodología

Análisis cuantitativo

?Métodos de cuantificación relativos

-Normalización

-Normalización corregida

?Métodos de cuantificación absolutos

-Patrón externo

-Patrón interno

-Adición estándar

Tratamiento de datos

Preparación de muestras para análisis por GC

?Extracción

-De matrices gaseosas

-De matrices líquidas

-De matrices sólidas

?Purificación

?Derivatización

Desarrollo de métodos de análisis en GC

?Objetivos de la separación

?Concentración de analito

?Muestreo y pretratamiento de muestra

?Selección temperatura y modo de inyección

?Selección gas portador

?Selección columna y fase estacionaria

?Selección temperaturas del horno

Troubleshooting

Aplicaciones de la Cromatografía de gases

Ejemplos

Prácticas:

?Desarrollo de métodos de análisis (simulación)

?Módulos y componentes del cromatógrafo de gases

?Desarrollo de método de análisis cualitativo para una mezcla de hidrocarburos aromáticos

?Análisis cuantitativo de un precursor de PVC por el método de patrón interno

?Optimización de parámetros de inyección: modo split/splitless y tiempo de splitless

?Optimización de parámetros de inyección: análisis por headspace de componentes de una bebida alcohólica

VALIDACIÓN DE MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS

Definición

Consideraciones básicas

?Conceptos básicos

?Normativa: ICH, USP EP, etc.

Parámetros de validación y criterios de aceptación

?Especificidad

?Linealidad

?Precisión

-Repetibilidad

-Precisión intermedia

-Reproducibilidad

?Exactitud

?Rango

?Límite de detección

?Límite de cuantificación

?Robustez

?Idoneidad del sistema

Revalidación al modificar métodos previamente validados: criterios de las farmacopeas

Ejemplos

CONFERENCIAS

EVALUACIÓN DEL CURSO